Купить набор реагентов состоит из одной банки со средой ПАЛ и 5 флаконов с селективной добавкой (СД).
Среда ПАЛ Оболенск представляет собой мелкодисперсный порошок светло-желтого цвета, который получают смешиванием сухих компонентов. Порошок гигроскопичен, светочувствителен.
СД представляет собой мелкодисперсный порошок розового цвета. Порошок гигроскопичен, светочувствителен.
Среда ПАЛ Оболенск выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г, СД во флаконах по 0,045 г.
2.1. Принцип действия
Выделение листерий основано на их способности гидролизовать эскулин с образованием эскулетина, который в присутствии ионов железа образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний. Ингибиторы подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
2.2. Состав
Среда ПАЛ Оболенск, г/л:
| Панкреатический гидролизат рыбной муки ……………… | 7,5 |
| Пептон ………………………………………………………. | 7,5 |
| Панкреатический гидролизат казеина (ПГК) ……………… | 10,0 |
| Дрожжевой экстракт………………….……………………… | 2,0 |
| Литий хлористый …………………………………………………………. | 13,0 |
| Эскулин ……………..……………………………………….. | 0,8 |
| Железо (III) лимонноаммиачное зеленое или железо (III) лимонноаммиачное коричневое ………………. | 0,5 |
| Натрий хлористый ………..…………………………………. | 3,5 |
| Натрий углекислый …………………………………………. | 0,1 — 0,3 |
| Агар микробиологический …………………………………………… | 11,0±3,0 |
Состав СД, г/л:
| Полимиксина В сульфат ……………………………………… | 0,01 |
| Налидиксовая кислота ……………………………………… | 0,025 |
| Акрифлавин ………………………………………………….. | 0,01 |
- АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Набор реагентов обеспечивает рост листерий не позднее 48 ч инкубации при температуре (37±1) °С и подавляет рост эшерихий, протеев и стафилококков.
- МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
При анализе исследуемого материала – соблюдение СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
- ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- Термостат, обеспечивающий температуру 37 °С
- Весы лабораторные 2 класса точности
- Автоклав
- Пипетки стеклянные, позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
- Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
- Чашки Петри
- Вода дистиллированная
- Колбы
- Воронки стеклянные
- АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Объекты исследований в клинической, санитарной и пищевой микробиологии.
- Проведение АНАЛИЗа
7.1. Приготовление среды ПАЛ.
Препарат в количестве, указанном на этикетке, тщательно размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят в течение 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.
7.1.1 Приготовление среды ПАЛ с селективной добавкой.
Содержимое флакона с селективной добавкой растворяют в 5 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают и вносят в стерильную, охлажденную до температуры 50-55 °С среду ПАЛ из расчета 5 мл на 1 л среды.
Готовая среда в чашках прозрачная желто-зеленого цвета.
Готовую среду, разлитую в чашки Петри, можно использовать в течение 7 суток при температуре хранения 2-8 °С.
7.2. Взятие, посев исследуемого материала проводят в соответствии с
ГОСТ Р 51921-2002 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения бактерий Listeria monocytogenes», МУК 4.2.1122-02 «Организация контроля и методы выявления бактерий Listeria monocytogenes в пищевых продуктах».
7.3. Исследуемый материал засевают соответственно на две чашки Петри со средой ПАЛ и стерильным шпателем распределяют взвесь по поверхности среды. Инкубируют при температуре (37±1) ° С не более 48 ч.
- УЧЕТ И РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Учет результатов проводят не позднее 48 ч инкубации посевов при температуре (37±1) ° С, визуально учитывая наличие и характер роста.
Колонии L. monocytogenes – мелкие, круглые, серо-желтого цвета, диаметром
0,4-1,2 мм с образованием вокруг колоний черной зоны.
Колонии L. ivanovi – мелкие, круглые, серо-желтого цвета, диаметром 0,2-1,0 мм с образованием вокруг колоний черной зоны.
Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее чем в трех повторностях.
- УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
Набор реагентов необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.
Срок годности набора реагентов: среды ПАЛ – 2 года, СД — не менее срока годности среды. Набор с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов «Питательный агар для выделения листерий (среда ПАЛ)» в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.
Возможен выпуск набора реагентов в комплектации по требованию заказчика
