Левина-ГРМ Оболенск Питательная среда с эозин-метиленовым синим для выделения и дифференциации патогенных и условно патогенных энтеробактерий, а также для выделения стафилококков, сухая.
Цена за упаковку 0,25 кг
ИНСТРУКЦИЯ по применению питательной среды с эозин-метиленовым синим сухой — Среда Левина-ГРМ Оболенск
- НАЗНАЧЕНИЕ
Среда Левина-ГРМ Оболенск предназначена для бактериологических исследований в санитарной и клинической микробиологии с целью выделения и дифференциации патогенных и условно патогенных энтеробактерий, а также для выделения стафилококков.
- характеристика
Среда Левина-ГРМ Оболенск представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок светло-сиреневого цвета.
Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.
2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Наличие в среде эозина и метиленового синего придают ей селективные свойства.
Дифференцирующая способность среды основана на изменении рН среды под действием кислоты, образующейся при ферментации бактериями лактозы. Комплекс индикаторов в кислой зоне окрашивает колонии кислотообразующих бактерий в темно-фиолетовый цвет, некоторые колонии имеют зеленоватый металлический блеск.
2.2. СОСТАВ
Среда Левина-ГРМ Оболенск представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:
Панкреатический гидролизат рыбной муки …………. | 12,0 |
Дрожжевой экстракт ………………………………….. | 1,0 |
a-Д-лактоза, 1-водная ………………………………… | 10,0 |
Натрия гидрофосфат ………………………………….. | 0,7 |
Натрия хлорид ………………………………………… | 4,2 |
Эозин-Н ……………………………………………….. | 0,4 |
Метиленовый синий ………………………………….. | 0,065 |
Агар микробиологический …………………………… | 9,0±3,0 |
- АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Среда Левина-ГРМ должна обеспечивать на всех засеянных чашках Петри рост тест-штаммов Shigella flexneri 1a 8516 и Escherichia coli 168/59 (O111:K58) через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры каждого тест-штамма из разведения 10-7, и рост тест-штамма Staphylococcus aureus 209-P (АТСС 6538-Р) через 48 ч инкубации при температуре (37±1) °С при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры тест-штамма из разведения 10-5.
Дифференцирующие свойства среды. Питательная среда должна обеспечивать чёткую дифференциацию шигелл от эшерихий на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл микробной смеси S. flexneri 1a 8516 и E. coli 168/59 (O111:K58) из разведения 10-6 (в соотношении 1:1) через 18- 20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.
- МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения питательной среды в соответствии с Приказом
МЗ РФ №4н от 06.6.2012 — класс 2 а.
При анализе исследуемого материала необходимо соблюдение СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
- ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- Термостат обеспечивающий температуру 37±1 °С
- Весы лабораторные 2 класса точности
- Автоклав
- Пробирки стеклянные
- Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
- Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
- Чашки Петри стерильные
- Вода дистиллированная
- Колбы
- Воронки стеклянные
- АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Объекты исследований в клинической лабораторной диагностике (кровь, желчь, моча, гной и т.д.).
- Проведение АНАЛИЗа
Исследование проводят в условиях бактериологической лаборатории медицинскими специалистами.
7.1. Приготовление среды Левина-ГРМ Оболенск.
Порошок в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят в течение 3 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют автоклавированием при температуре 110 °С в течение 20 мин. Стерильную среду охлаждают до температуры
45-50 °С, разливают в стерильные чашки Петри слоем 5-6 мм. После застывания среды чашки подсушивают при температуре (37±1)°С в течение 40-60 мин. Готовая среда в чашках Петри прозрачная, от светло-сиреневого до красновато-коричневого цвета.
Стерильную среду можно использовать в течение 3-х дней при условии ее хранения при температуре 2-8 C.
7.2. Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с “Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями” (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535 “Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”.
7.3. Исследуемый материал стерильным шпателем тщательно втирают по всей поверхности среды. Инкубируют при температуре (37±1) °С в течение 46-48 ч.
- РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С визуально учитывают характер роста культур S. flexneri 1a 8516 и E.coli 168/59 (O111:K58) и через 46-48 ч характер роста культуры S.aureus 209-P (АТСС 6538-Р).
Колонии S.flexneri 1a 8516 должны быть круглыми, прозрачными, бесцветными или слабо-розовыми, диаметром 1,0-1,5 мм.
Колонии E.coli 168/59 (O111:K58) должны быть круглыми, темно-фиолетового цвета с зеленым металлическим блеском (возможно наличие отдельных колоний без металлического блеска), диаметром 1,5-2,0 мм.
Колонии S. aureus 209-P (АТСС 6538-Р) должны быть круглыми, бесцветными или светло-фиолетовыми с темным центром, диаметром до 1,0 мм.
- УТИЛИЗАЦИЯ
Утилизация серий среды Левина-ГРМ Оболенск с истекшим сроком годности производится по
СанПиН 2.1.7.2790-10 как медицинские отходы, принадлежащие к классу «А» — эпидемиологически безопасные отходы.
Уничтожение среды Левина-ГРМ после проведения биологического контроля осуществляется по СанПиН 2.1.7.2790-10 как медицинские отходы, принадлежащие к классу «Б» с обязательным предварительным обезвреживанием путем автоклавирования в течение 2 ч при температуре (133±1) ˚С.
Обращение с медицинскими отходами следует выполнять согласно схеме, принятой в конкретной организации, осуществляющей медицинскую и (или) фармацевтическую деятельность. Данная схема разрабатывается в соответствии с требованиями вышеуказанных санитарных правил и утверждается руководителем организации.
- УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
Среду Левина-ГРМ необходимо хранить в герметично закрытой упаковке при температуре от 2 до 30 С и относительной влажности не более 60 %.
Срок годности: 2 года. Среда с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
Изготовитель гарантирует соответствие среды Левина-ГРМ заявленным в
ТУ 9398-054-78095326-2008 требованиям и функциональным характеристикам с начала использования в течение всего срока годности и при соблюдении условий хранения и транспортирования.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.
По вопросам, касающимся качества среды Левина-ГРМ в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.