Бифидум-среда Оболенск — Цена за упаковку 0,25 кг
ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований
«Питательная среда для культивирования и выделения бифидобактерий сухая» Бифидум-среда Оболенск
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Бифидум-среда Оболенск предназначена для культивирования бифидобактерий при производстве пробиотических препаратов, а также для бактериологических исследований с целью выделения бифидобактерий из клинического материала.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА
Бифидум-среда Оболенск представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок светло-желтого цвета.
Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.
2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Полужидкая среда в сочетании с цистеин гидрохлоридом создают анаэробные условия, а совокупность компонентов, входящих в состав среды, обеспечивает питательные потребности для роста бифидобактерий.
2.2. СОСТАВ
Бифидум-среда представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:
|
Панкреатический гидролизат казеина…………………………. |
30,0 |
|
Дрожжевой экстракт ……………………………………… |
5,0 |
|
-Д-лактоза ……..………………………………….…….… |
2,5 |
|
Д-глюкоза ………………………….…………………….…. |
7,5 |
|
Цистеина гидрохлорид ……………………………………. |
0,5 |
|
Натрий хлористый ………………………………………… |
2,5 |
|
Магний сернокислый ………………………………………. |
0,5 |
|
Кислота аскорбиновая ………………………….…………. |
0,5 |
|
Натрий уксуснокислый ………………….………………… |
0,3 |
|
Агар микробиологический ………………………………… |
0,9 |
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Питательная среда должна обеспечивать не позднее 72 ч инкубации при температуре (371) С визуально обнаруживаемый рост тест-штаммов Bifidobacterium breve ATCC 15701, Bifidobacterium adolescentis ATCC 15705, Bifidobacterium infantis ATCC 15702, Bifidobacterium longum ATCC 15708, Bifidobacterium bifidum 1 во всех засеянных пробирках при посеве по 1,0 мл микробной взвеси каждого тест-штамма из разведения 10-6 и не менее чем в одной (из трех засеянных) пробирке — из разведения 10-7.
Питательная среда должна обеспечивать дифференциацию по характеру роста тест-штаммов бифидобактерий через 24-72 ч инкубации при температуре (371) С от тест-штаммов Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
При анализе исследуемого материала – соблюдение СП 1.2.731-99 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности и гельминтами».
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Термостат, обеспечивающий температуру 37±1 С
Весы лабораторные 2 класса точности
Автоклав
Пробирки стеклянные
Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
Чашки Петри стерильные
Вода дистиллированная
Колбы
Воронки стеклянные
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Объекты исследований в клинической микробиологии.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Приготовление Бифидум-среды.
50,0 г порошка тщательно размешивают в 1 л воды дистиллированной, кипятят в течение 1 мин, периодически перемешивая, до полного расплавления агара, при необходимости фильтруют, разливают по 9,0 мл в стерильные пробирки и стерилизуют автоклавированием при температуре 112 С в течение 30 мин.
Готовая к употреблению питательная среда прозрачная, желтого или желтовато-коричневого цвета.
Стерильную среду можно хранить не более 2-х сут при температуре 2-8 С, перед использованием регенерировать путем нагревания ее в кипящей водяной бане в течение
15-20 мин и последующего охлаждения в холодной воде.
7.2. Выделение бифидобактерий из клинического материала проводят в соответствии с Методическими рекомендациями «Применение бактерийных биологических препаратов в практике лечения больных кишечными инфекциями. Диагностика и лечение дисбактериоза кишечника» (Москва, 1986) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535 “Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”.
7.3. Исследуемый материал вносят в три пробирки, содержащие по 9,0 мл Бифидум-среды, погружая пипетку в середину столбика среды, аккуратно перемешивая пипеткой. Во избежании аэрирования не следует содержимое пипетки выдувать до конца. Через каждые сутки, но не позднее 72 ч инкубации посевов при температуре (371) С визуально определяют наличие и характер роста.
РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Бифидобактерии вырастают в Бифидум-среде через 24-72 инкубации при температуре (371) С в виде колоний типа «комет», «гвоздиков», «тяжей», «зерен» различной степени четкости. Рост бифидобактерий подтверждают микроскопически. Бифидобактерии представляют собой грамположительные палочки слегка изогнутые, с разветвлением на одном или двух концах, расположенных в виде буквы V, гантелевидной формы, булавовидными утолщениями или в виде скоплений, напоминающих китайские иероглифы.
При росте в Бифидум-среде кишечной палочки наблюдается диффузное помутнение столбика среды с газообразованием в виде пены; синегнойной палочки — диффузное помутнение верхней части столбика среды с последующим распространением помутнения вниз по среде.
9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
Бифидум-среду необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.
Срок годности – 2 года. Среда с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.
По вопросам, касающимся качества Бифидум-среды в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.
