СРБ латекс-тест Комплект №1 250 определений (Набор реагентов для определения С-реактивного белка в реакции агглютинации латекса (качественный и количественный анализ) (12.01)
Инструкция по применению набора реагентов «СРБ ЛАТЕКС-ТЕСТ»
Набор реагентов для определения С-реактивного белка в реакции агглютинации латекса
Регистрационное удостоверение № ФСР 2011/12205 от 03.11.11 г.
- НАЗНАЧЕНИЕ
Для выявления и определения содержания СРБ в сыворотке крови человека методом реакции агглютинации латекса (РАЛ). СРБ является белком острой фазы, концентрация которого возрастает при воспалительных процессах, повреждениях тканей, бактериемии и вирусных инфекциях. При воспалительных процессах, связанных с бактериальными инфекциями, концентрация СРБ может повышаться до 300 мг/л за 12-24 часа.
- ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
При наличии в исследуемой пробе СРБ он взаимодействует с соответствующими антителами, находящимися на поверхности латексных частиц. Результатом взаимодействия является агглютинация латекса с образованием мелких или крупных зерен, различимых визуально.
2.2. Состав набора
СРБ-латексный реагент – суспензия монодисперсного полистирольного латекса с иммобилизованным на поверхности его частиц иммуноглобулином (IgG) к СРБ человека; суспензия белого цвета, при хранении разделяется на осадок белого цвета, легко разбивающийся при встряхивании, и бесцветную прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость. Чувствительность СРБ-латекса откалибрована относительно референсного материала CRM 470/RPPHS.
Физиологический раствор (ФР) – 0,9 % раствор натрия хлорида; содержит консервант — азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная жидкость
Положительная контрольная сыворотка (К+) — жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течение 1 ч, содержащая СРБ в концентрации не менее 12 мг/л, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; консервант – натрия азид, в конечной концентрации 0,1 %. Прозрачная бесцветная или от желтоватого до красно-коричневатого цвета жидкость.
Отрицательная контрольная сыворотка (К–) – жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течение 1 ч, содержащая СРБ в концентрации менее 6 мг/л, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; консервант – натрия азид, в конечной концентрации 0,1 %. Прозрачная или желтоватого цвета жидкость.
- АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Набор рассчитан на проведение 250 исследований, включая контрольные образцы.
Набор позволяет обнаруживать СРБ в неразведенной сыворотке крови человека в концентрации от 6 мг/л и выше.
- МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Набор биологически безопасен, но при работе с исследуемыми образцами сыворотки необходимо обращаться с ними как с потенциально инфицированными материалами.
- ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
— Шейкер орбитальный (любой марки с амплитудой колебаний 10-20 мм).
— Градуированные пипетки 2 класса точности или дозаторы пипеточные.
— Микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 20 мкл).
-Палочки стеклянные или пластиковые.
— Часы или таймер.
- ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Используется свежеполученная сыворотка крови. Использование в качестве образцов плазмы крови не допускается. Забор крови должен быть произведен согласно стандартной процедуре. Допускается хранение образцов 7 дней при 2-8 ˚С или 3 месяца при температуре минус 20 ˚С. Не подвергать образцы повторному замораживанию и оттаиванию.
Исследуемая сыворотка должна быть прозрачной и не содержать взвешенных частиц.
Образцы, содержащие осадок, перед анализом должны быть отцентрифугированы в течении 10-15 мин при 2,5-3,0 тыс. об/мин
Не использовать гемолизированные или загрязненные образцы.
- ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Подготовка реагентов и материалов
Выдержать все компоненты набора и исследуемые образцы не менее 20 мин при комнатной температуре. Легким встряхиванием флакона тщательно перемешать СРБ-латексный реагент. Контрольные сыворотки и физиологический раствор готовы к применению.
Подготовить дополнительное оборудование:
- пластину стеклянную или карточку для постановки реакции;
- микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 10-50 мкл);
- палочки стеклянные или пластиковые;
- часы или таймер.
7.2. Качественное определение
Нанести на первую ячейку карточки 20 мкл К+, на соседнюю ячейку карточки — 20 мкл К–. На свободные ячейки карточки нанести по 20 мкл исследуемых образцов.
Тщательно перемешанный СРБ-латексный реагент добавить по 20 мкл в каждую ячейку с образцом. Плоским концом пипетки-мешалки (стеклянной палочкой) осторожно перемешать каждую каплю, распределив реакционную смесь по всей площади ячейки. Для каждой капли использовать новую пипетку-мешалку (стеклянную палочку).
Покачивать карточку вручную или на шейкере в течение 2 мин., после чего сразу произвести учет результатов реакции.
7.3. Полуколичественное определение
Непосредственно на карточке для постановки реакции приготовить следующие разведения исследуемого образца в физиологическом растворе 9 г/л: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 и 1:64. При необходимости число разведений можно увеличить.
Легким встряхиванием флакона перемешать СРБ-латексный реагент и добавить по 20 мкл в каждую ячейку с разведением исследуемого образца, после чего перемешать каждую каплю, как указано выше для качественного определения.
Покачивать карточку вручную или на шейкере в течение 2 мин., после чего сразу произвести учет результатов реакции.
- РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Учет результатов проводят визуально на темном фоне после внесения реагента в исследуемый образец не позднее 2 мин., при более позднем учете могут быть получены ложноположительные результаты.
Положительной РАЛ считается наличие агглютинации латекса (любое появление зернистости или различимых частиц).
Отрицательной РАЛ считается отсутствие агглютинации (жидкость в ячейке остается мутной и однородной).
Результаты реакции с исследуемыми образцами учитываются только при положительной реакции с К+ и отрицательной с К–.
Качественное определение
Положительная реакция свидетельствует о наличии СРБ в исследуемой сыворотке в концентрации более 6 мг/л. Все образцы давшую положительную реакцию, подлежат дополнительному количественному исследованию.
Отрицательная реакция свидетельствует, что концентрация СРБ составляет менее 6 мг/л.
Количественное определение
По результатам титрования образца определить величину, обратную титру СРБ.
Концентрацию СРБ в образце рассчитать по формуле:
концентрация СРБ (мг/л) = 6 мг/л×(величина, обратная титру образца)
где 6 мг/л – минимальная концентрация СРБ, определяемая в РАЛ;
Пример:
Титр исследуемого образца с положительной РАЛ — 1:32;
концентрация СРБ =6 мг/л x32 = 192 мг/л
Если концентрация СРБ в пробе более1600 мг/л может наблюдаться эффект прозоны. Для исключения этого сыворотку рекомендуется разводить.
Клинический диагноз не должен основываться на заключении результата одного теста и должен объединять клинические и лабораторные данные исследования.
- ФОРМА ВЫПУСКА
Набор выпускается в комплектации:
| Наименование компонента | |
| СРБ-латексный
реагент |
5,0 мл- 1 фл. |
| К+ | 0,5 мл- 1 фл. |
| К– | 0,5 мл- 1 фл. |
| ФР- | 25 мл- 1 фл. |
| Карточки для постановки реакции | 25 шт. |
- СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВКИ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Срок годности набора – 2 года.
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 оС в течение всего срока годности. Замораживание не допускается.
Набор транспортируют при температуре от 2 до 8 оС; допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 оС в течение 10 сут. Замораживание не допускается.
Неиспользованные реагенты хранят в герметично укупоренной таре при температуре от 2 до 8 оС до истечения срока годности набора.
- УСЛОВИЯ ОТПУСКА
Для учреждений здравоохранения.
По вопросам, касающимся качества набора «СРБ латекс-тест», следует обращаться по адресу 142530 Московская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д. 1, ЗАО «ЭКОлаб»; тел. (49643) 3-23-11, факс (49643) 3-30-93 – отдел сбыта, (49643) 3-37-30 – ОБТК.
Взамен инструкции, утвержденной 22.12.2006 г.
